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做抑菌试验牛津杯如何使用?

点击次数:278 发布时间:2021-10-15
  牛津杯在做抗生素作用效果实验时要用,用于微生物培养实验,测定不同药物对细菌的敏感度。实验时在培养基上接种微生物,生长出来后,放上牛津杯,把抗生素倒到牛津杯里,然后继续培养,过一段时间,观察抑菌圈的大小,判断抗生素的效果。牛津杯法,是抗生素效价测定的一种方法,通常可以分为二剂量法和三剂量法。

牛津杯在做抑菌试验时的操作步骤如下:

将已灭菌的琼脂培养基加热到完全融化,倒在培养皿内,每皿15ml(下层),待其凝固。此外,将融化的PDA培养基冷却到50℃左右混入试验菌17号,将混有菌的培养基5ml加到已凝固的培养基上待凝固(上层)。

以无菌操作在培养基表面直接垂直放上牛津杯(内径6mm、外径8mm、高10 mm的圆形小管,管的两端要光滑,也可用玻璃管、瓷管),轻轻加压,使其与培养基接触无空隙,在杯中加入待检样品(发酵液),杯子一般可以装240微 升,勿使其外溢。加满后置37℃培养16-18小时,观察结果,抑菌圈用尺直接量就可以。在培养中,一方面试验菌开始生长,另一方面抗生素呈球面扩散,离杯越近,抗生素浓度越大,离杯越远抗生素浓度越小。随着抗生素浓度减小,有一条抑菌浓度带,在带范围内,菌不能生长,而呈透明的圆圈,这就叫“抑菌圈”。抗生素浓度越高,抑菌圈越大。

 

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